Mērķis un pakāpieni, kas iesaistīti kariotipa testā
Ja ārsts ir ieteikusi Jums vai Jūsu bērnam veikt kariotipu testu vai pēc amniocentēzes, ko tas nozīmē? Kādos apstākļos var diagnosticēt kariotipu, kādi ir soļu posmi testu veikšanā un kādi ir tā ierobežojumi?
Kas ir kariotipa tests?
Kariotīms ir hromosomu fotogrāfija šūnā . Kariotīpes var ņemt no asins šūnām, augļa ādas šūnām (no augļa šķidruma vai placentas) vai kaulu smadzeņu šūnām.
Kādus nosacījumus var diagnosticēt ar karotīda testu?
Kariotīpes var izmantot, lai pārbaudītu un apstiprinātu hromosomu anomālijas, piemēram, Down's sindromu, un ir vairāki dažādi noviržu veidi, kurus var konstatēt.
Viens no tiem ir trisomijas, kurās ir trīs eksemplāri no vienas hromosomas, nevis divas. Savukārt monosomijas notiek tad, ja ir tikai viena kopija (nevis divas). Papildus trisomijām un monosomijām ir arī hromosomu dzēšana, kurā trūkst hromosomas daļas, un hromosomu translokācijas, kurās daļa no vienas hromosomas ir piesaistīta citai hromosomai (un otrādi - līdzsvarotās translocācijās).
Piemēri trisomies ietver:
- Dauna sindroms (trisomija 21)
- Edwarda sindroms ( trisomija 18 )
- Patau sindroms (trisomija 13)
- Klinefeltera sindroms (XXY un citi varianti) - Klinefeltera sindroms rodas 1 no 500 jaundzimušajiem vīriešiem un, šķiet, pieaug sastopamība
- Triple X sindroms (XXX)
Monosomijas piemērs ietver:
- Tērnera sindroms (X0) vai monosomija X - Aptuveni 15 procenti izlaidumu rodas Turner sindroma dēļ, bet šī trisomija ir tikai aptuveni 1 no 2000 dzīviem dzimušajiem
Piemēri hromosomu dzēšanu ir:
- Cri-du-Chat sindroms (trūkst hromosomas 5)
- Viljamsa sindroms (trūkst 7 hromosomas)
Translocations - Ir daudz piemēru translocations ieskaitot translokācijas Down sindroms. Robertsonijas translokācijas ir diezgan izplatītas, sastopamas aptuveni 1 no 1000 cilvēkiem.
Mosaicisms ir stāvoklis, kad dažām ķermeņa šūnām ir hromosomu anomālija, bet citiem tas nav. Piemēram, mozaīkas Dauna sindroms vai mozaīkas trisomija 9. Pilna trisomija 9 nav saderīga ar dzīvību, bet mozaīkas trisomija 9 var izraisīt dzīvu dzimšanu.
(Piemērs ir vērts tūkstoš vārdiem. Uzziniet par atšķirībām starp translokāciju, trisomiju un mozaīkas Dauna sindromu .)
Kad ir pabeigts kariotips?
Pastāv vairākas situācijas, kurās ārsts var ieteikt kariotipu. Tie var ietvert:
- Zīdaiņi vai bērni, kuriem ir veselības stāvoklis, kas norāda uz hronometra novirzi, kas vēl nav diagnosticēta.
- Pieaugušajiem, kuriem ir simptomi, kas norāda uz hromosomu anomālijām (piemēram, vīrieši ar Klinefelter slimību var netikt diagnosticēti līdz pubertātes vai pieauguša vecuma sasniegšanai). Daži no mozaīkas trisomijas traucējumiem var arī nenotikt diagnostikā.
- Neauglība - ģenētisko kariotipu var veikt neauglības dēļ. Kā minēts iepriekš, daži hromosomu patoloģijas var nenotikt diagnozei līdz pieauguša cilvēka vecumam. Sieviete ar Turner sindromu vai vīrietis ar vienu no Klinefeltera variantiem var nebūt informēts par stāvokli, līdz viņi nonāk ar neauglību.
- Pirmsdzemdību pārbaude - dažos gadījumos, piemēram, tulkošana Dauna sindroms, stāvoklis var būt iedzimts un vecākus var pārbaudīt, ja bērns ir piedzimis ar Dauna sindromu. (Ir svarīgi atzīmēt, ka lielākā daļa laika Down sindroms nav iedzimts traucējums, bet gan iespēja mutācijas.)
- Stillbirth - Kariotips bieži tiek veikts kā daļa no testēšanas pēc mirstības.
- Atkārtotas nepareizas spontānās abakcijas - vecāku kariotips atkārtotu abortu gadījumā var dot norādes par šo postošo atkārtoto zaudējumu iemesliem. Domājams, ka hromosomu patoloģijas, piemēram, trisomija 16, izraisa vismaz 50% iztukšošanas.
- Leikēmija. Var veikt arī kariotipus testēšanu, lai palīdzētu diagnosticēt leikēmijas, piemēram, meklējot Philadelphia hromosomu, kas konstatēta dažiem cilvēkiem ar hronisku mieloleikozes leikēmiju vai akūtu limfocītu leikēmiju.
Pasākumi, kas iesaistīti kariotipa testā
Kariotīda tests var izklausīties kā vienkāršs asins analīzes rezultāts, kas daudziem cilvēkiem rada pārsteigumu, kāpēc rezultātu iegūšanai ir vajadzīgs tik ilgs laiks. Šis tests pēc savākšanas patiešām ir diezgan sarežģīts. Apskatīsim šos soļus, lai jūs varētu saprast, kas notiek testa gaitā.
1. Paraugu savākšana
Pirmais solis kariotipa izpildē ir iegūt paraugu. Jaundzimušajiem tiek savākts asins paraugs, kas satur sarkano asins šūnu, balto asins šūnu, seruma un citu šķidrumu. Kariotips tiks veikts uz balto asins šūnu, kas aktīvi sadalās (valsts, kas pazīstama kā mitozes). Grūtniecības laikā paraugs var būt vai nu amnija šķidrums, kas tiek savākts amniocentēzes laikā, vai arī placentas gabals, kas savākts, veicot horiionisku vistu paraugu ņemšanas testu (CVS). Amnija šķidrumā ir augļa ādas šūnas, ko izmanto, lai radītu kariotipu.
2. Transports uz laboratoriju
Kariotīpes tiek veiktas konkrētā laboratorijā, ko sauc par citoģenētikas laboratoriju - laboratoriju, kas izskata hromosomas. Ne visām slimnīcām ir citoģenētikas laboratorijas. Ja jūsu slimnīcā vai medicīnas iestādē nav sava citoģenētikas laboratorijas, testa paraugs tiks nosūtīts laboratorijai, kas specializējusies kariotipa analīzē. Testa paraugu analizē speciāli apmācīti citoģenētiski tehnologi, Ph.D. citogenetiķi vai medicīnas ģenētikas speciālisti.
3. Šūnu atdalīšana
Lai analizētu hromosomas, paraugam ir jābūt šūnām, kas aktīvi sadalās. Asinīs, baltie asins šūnas aktīvi sadalās. Lielākā daļa augļa šūnu tiek aktīvi sadalīti. Kad paraugs nonāk citoģenētikas laboratorijā, nesadalītās šūnas tiek atdalītas no sadalošajām šūnām, izmantojot īpašas ķīmiskas vielas.
4. Augošās šūnas
Lai būtu pietiekami daudz šūnu, kas jāanalizē, sadalošās šūnas tiek audzētas īpašā vidē vai šūnu kultūrā. Šajos medikamentos ir ķīmiskas vielas un hormoni, kas ļauj šūnām sadalīt un vairoties. Šis kultivēšanas process var ilgt trīs līdz četras dienas asins šūnām un līdz pat nedēļai augļa šūnām.
5. Šūnu sinhronizācija
Hromosomas ir garš cilvēka DNS virkne. Lai redzētu hromosomas mikroskopā, hromosomām jābūt viskomponentākajā formā šūnu dalīšanās fāzē (mitozes), kas pazīstama kā metafāze. Lai iegūtu visas šūnas šai specifiskajai šūnu dalīšanās stadijai, šūnas tiek apstrādātas ar ķīmisku vielu, kas pārtrauc šūnu dalīšanu tajā vietā, kur hromosomas ir visietriskākās.
6. Hromosomu atbrīvošana no šūnām
Lai redzētu šos kompaktos hromosomus zem mikroskopa, hromosomām jābūt ārpus balto asins šūnu. To dara, ārstējot balto asins šūnu ar īpašu risinājumu, kas izraisa to plaisu. To dara, kamēr šūnas atrodas mikroskopiskā slaida galā. Balto asinsķermenīšu atlikumi paliek nomazgāti, atstājot hromosomām piestiprinātas pie slaida.
7. Krāsojot hromosomas
Hromosomas ir dabiski bezkrāsainas. Lai sakārtotu vienu hromosomu no cita, slidei tiek uzlikts īpašs krāsviela ar nosaukumu Giemsa krāsviela. Giemsa krāsas traipi ir hromosomu reģioni, kas bagāti ar bāzes adenīnu (A) un timīnu (T). Krāsojot, hromosomas izskatās kā virknes ar vieglām un tumšām joslām. Katrā hromosomā ir īpašs gaismas un tumšās joslas modelis, kas ļauj citoģenētikam izlikt vienu hromosomu no cita. Katra tumsa vai gaismas josla aptver simtiem dažādu gēnu.
8. Analīze
Pēc tam, kad hromosomas ir iekrāsotas, slīdni ievieto mikroskopā analīzei. Tad tiek ņemts attēls no hromosomām. Līdz analīzes beigām tiks noteikts kopējais hromosomu skaits, un hromosomas tiek sakārtotas pēc lieluma.
9. Hromosomu skaitīšana
Pirmais analīzes solis ir hromosomu skaitīšana. Lielākajai daļai cilvēku ir 46 hromosomas. Cilvēkiem ar Dauna sindromu ir 47 hromosomas. Ir arī iespējams, ka cilvēkiem ir trūkstošās hromosomas, vairāk nekā viena papildu hromosoma vai daļa no hromosomas, kas ir vai nu pazudusi, vai pavairota. Aplūkojot tikai hromosomu skaitu, ir iespējams diagnosticēt dažādus apstākļus, tostarp Dauna sindromu.
10. Hromosomu šķirošana
Pēc hromosomu skaita noteikšanas citoģenētikas uzsāks hromosomu šķirošanu. Lai sakārtotu hromosomas, citoģenētists salīdzinās hromosomu garumu, centromēru izvietojumu (apgabalus, kuros ir apvienoti divi hromatīdi), kā arī G joslu atrašanās vietu un izmērus. Hromosomu pāri ir numurēti no lielākajiem (no 1) līdz mazākajiem (22. numurs). Ir 22 pāri hromosomas, ko sauc par autosomes, kas precīzi sakrīt. Ir arī dzimuma hromosomas, mātītēm ir divas X hromosomas, savukārt vīriešiem ir X un Y.
11. Raugoties uz struktūru
Papildus tam, kā apskatīt kopējo hromosomu skaitu un dzimuma hromosomas, citoģenētikas speciālists aplūko arī specifisko hromosomu struktūru, lai pārliecinātos, ka nav trūkstošu vai papildu materiālu, kā arī strukturālās novirzes, piemēram, translocations. Pārvietošanās notiek tad, kad daļa no vienas hromosomas ir pievienota citai hromosomai. Dažos gadījumos divas pieced hromosomas tiek savstarpēji mainītas (līdzsvarota pārvietošana), un citos gadījumos vienam hromosomam atsevišķi pievieno vai pazūd papildu gabals.
12. Galīgais rezultāts
Galu galā kariotips parāda kopējo hromosomu skaitu, dzimumu un jebkuras strukturālas novirzes ar atsevišķām hromosomām. Hromosomu digitālais attēls tiek ģenerēts ar visām hromosomām, kas sakārtotas pēc skaita.
Kariotīka testēšanas ierobežojumi
Ir svarīgi atzīmēt, ka, lai gan karotīda testēšana var sniegt daudz informācijas par hromosomām, šis tests nevar jums pateikt, vai pastāv specifiskas gēnu mutācijas, piemēram, tās, kas izraisa cistisko fibrozi . Jūsu ģenētiskais konsultants var palīdzēt jums saprast gan to, ko kariotipa testi var jums pateikt un ko viņi nevar. Lai novērtētu iespējamo gēnu mutāciju lomu slimību vai spontāno abortu gadījumā, ir vajadzīgi papildu pētījumi.
Ir arī svarīgi atzīmēt, ka dažreiz kariotipa testēšana var nespēt noteikt dažus hromosomu patoloģijas, piemēram, tad, ja ir placentas mosaicisms.
Nākotne
Pašreizējā laika periodā kardiotīvu pārbaude pirmsdzemdību periodā ir diezgan invazīvs, un tam ir nepieciešams amniocentēzes vai horioloģisko vīļu paraugu ņemšana. Pētījumi tiek veikti, novērtējot šūnu brīvu DNS mātes asins paraugā kā daudz mazāk invazīvu alternatīvu ģenētisko patoloģiju pirmsdzemdību diagnostikai auglim.
Apakšējā rinda par jūsu kariotipa rezultātu gaidīšanu
Gaidot savus kariotipa rezultātus, jums var būt ļoti vēlama sajūta, un nedēļā vai divās nedēļās, lai iegūtu rezultātus, var justies kā eoni. Ņemiet to laiku, lai paļauties uz saviem draugiem un ģimeni. Var būt arī noderīga informācija par dažiem no traucējumiem, kas saistīti ar patoloģiskām hromosomām. Lai gan daudzi no stāvokļiem, kas diagnosticēti ar kariotipu, var būt postošā, daudzi cilvēki dzīvo ar šiem apstākļiem, kuriem ir lieliska dzīves kvalitāte.
> Avoti
- > Kumārs, Vinay, Abul K. Abbas un Jon C. Aster. Robbins un Cotran patoloģiskais slimības pamats. Filadelfija: Elsevier-Saunders, 2015. gads. Drukāt.
- > Norton, M. un B. Rink. Inovatīvu testu indikāciju maiņa uzlabotas skrīninga laikā. Semināri perinatoloģijā . 2016. 40 (1): 56-66.
- > Shah, M., Cinnioglu, C., Maisenbacher, M., Comstock, I., Kort, J., un R. Lathi. Citogenetikas un molekulārās kariotipizēšanas salīdzinājums attiecībā uz alkohola remisijas paraugu hromosomu testēšanu. Auglība un sterilitāte . 2017. 107 (4): 1028-1033.